Imunitní imprinting, Comirnaty a Omicron (2)
Objevují se další podrobnosti o tom, proč mRNA vakcíny nezabraňují infekci Omicronem.
Substack, Robert W Malone MD, MS, 26. června 2022
V poslední době se u řady vysoce postavených, "plně očkovaných" (čtyři dávky) zastánců proočkovacích mandátů – politiků a úředníků, objevilo onemocnění COVID 19. V 1. části tohoto dvoudílného seriálu byla přezkoumána široká škála primárních dat i převážně recenzovaných akademických publikací týkajících se "průlomových infekcí" varianty SARS-CoV-2 Omicron, bylo popsáno několik pracovních hypotéz, co by mohlo být příčinou "negativní účinnosti" genetických vakcín, a byla diskutována jedna z hypotéz s nejsilnějšími podpůrnými daty ("imunitní imprinting"). Tato diskuse byla strukturována na základě úvodní části a odkazů citovaných v recenzovaném rukopise publikovaném v časopise Science s názvem:
Immune boosting by B.1.1.529 (Omicron) depends on previous SARS-CoV-2 exposure
Catherine J Reynolds, Corinna Pade, Joseph M Gibbons et al, Science, 14. června 2022 doi: 10.1126/science.abq1841
Tento článek není jednoduchý, i když není tak náročný jako preprint časopisu Nature ze 17. června 2022 s názvem "BA.2.12.1, BA.4 a BA.5 escape antibodies elicited by Omicron infection", který jsme zde stručně recenzovali.
Článek Reynoldsové et al v Science je dobře strukturovaný, s jasně označenými podsekcemi v celé části o výsledcích, jejichž klíčová zjištění budou stručně shrnuta níže.
Výsledky
Imunita B buněk po třech dávkách vakcíny
Zdravotničtí pracovníci (HCW) s mírnou a asymptomatickou infekcí SARS-CoV-2 byli infikováni předky Wuhan Hu-1, B.1.1.7 (Alpha VOC), B.1.617.2 (Delta VOC) a poté B.1.1.529 (Omicron VOC) během postupných vln infekce a po první, druhé a třetí dávce mRNA (BioNTech BNT162b2) vakcíny. Po třech dávkách vakcíny se protilátkové odpovědi ustálily bez ohledu na průběh infekce. Zjistili jsme rozdíly v imunitním imprintingu, které naznačují, že ti, kteří byli infikováni během předcházející vlny Wuhan Hu-1, vykazovali významně snížený titr anti-RBD (receptor binding domain – vazebná doména receptorů) proti B.1.351 (Beta), P.1 (Gamma) a B.1.1.529 (Omicron) ve srovnání s infekčně naivními HCW.
Zjednodušeně řečeno, pokud jste byli nejprve infikováni Wuhan Hu-1, poté očkováni a následně infikováni Omicronem, byly hladiny protilátek proti důležité části Spike (doméně vázající receptor) nižší než u těch, kteří infikováni nebyli.
Frekvence paměťových B buněk (MBC) proti předkům Wuhan Hu-1, B.1.617.2 (Delta) a B.1.1.529 (Omicron) S1 (extracelulární část Spike, která obsahuje RBD) proteinu byla zvýšena 2-3 týdny po třetí dávce vakcíny ve srovnání s 20–21 týdny po druhé dávce vakcíny. Bez ohledu na průběh infekce byla frekvence MBC proti Wuhan Hu-1 a B.1.617.2 (Delta) S1 podobná, ale významně snížená proti S1 B.1.1.529 (Omicron) 2–3 týdny po třetí dávce vakcíny a 20–21 týdnů po druhé dávce. Rozdíly mezi vazbou VOC (variant of concern – varianta, která vzbuzuje obavy) RBD a celého hrotu a IC50 nAb (neutralizační protilátky) s živým virem naznačují, že k neutralizaci mohou přispívat protilátky zaměřené na oblasti mimo RBD/hrot nebo konformační epitopy vystavené pouze během infekce.
Paměťové B buňky jsou tím, co dává vzniknout budoucí schopnosti vytvářet protilátky. Frekvence MBC je nepřímým ukazatelem dlouhodobé ochrany. Počet MBC schopných vytvářet protilátky reagující proti podjednotce Spike S1 se zvýšil po třetí injekci oproti dvěma injekcím bez ohledu na to, zda byl pacient dříve infikován, ale v případě Omicronu tyto hladiny klesly po dvou nebo třech dávkách vakcíny. Tyto účinky byly nezávislé na předchozí virové infekci v anamnéze. Což je další důkaz imunologického úniku Omicronu z protilátkové kontroly zprostředkované B-buňkami.
T buněčná imunita po třech dávkách vakcíny.
Dále jsme porovnávali odpovědi T buněk u třikrát očkovaných HCW 2–3 týdny po třetí dávce, kteří byli buď infekčně naivní, nebo byli infikováni během vlny Wuhan Hu-1, B.1.1.7 (Alfa) nebo B.1.617.2 (Delta). ... u proteinu S1 B.1.1.529 (Omicron) jsme zjistili významně sníženou velikost odpovědi. Celkově více než polovina (27/50; 54%) nevytvořila žádnou odpověď T lymfocytů proti proteinu S1 B.1.1.529 (Omicron), bez ohledu na předchozí anamnézu infekce SARS-CoV-2, ve srovnání s 8% (4/50), které nevytvořily žádnou odpověď T lymfocytů proti předkovému S1 proteinu Wuhan Hu-1.
To je problematické. Polovina z nich nedokázala vytvořit T-buňky na Omicron. T buňky se na ochraně podílejí významnou měrou a generování odpovědí B i T buněk je celým důvodem použití mRNA vakcíny.
Ke zkoumání rozpoznávání sekvenčních mutací VOC buňkami T jsme použili pool peptidů speciálně navržený tak, aby pokrýval všechny mutace hrotů B.1.1.529 (Omicron) S1 a S2, a odpovídající pool obsahující ekvivalentní sekvence Wuhan Hu-1. Odpovědi T-buněk proti souboru peptidů B.1.1.529 (Omicron) byly sníženy v porovnání se souborem peptidů Wuhan Hu-1 bez ohledu na předchozí infekční historii – násobné snížení odpovědi T-buněk proti B.1 .1.529 (Omicron) peptidový pool ve srovnání s ekvivalentním peptidovým poolem Wuhan Hu-1 byl 2,7násobný u infekčně naivních, 4,6násobný u dříve infikovaných Wuhan Hu-1, 2,7násobný u dříve infikovaných B.1.1.7 (Alpha) a 3,8násobný u dříve infikovaných B.1617.2 (Delta). Ve skutečnosti 42% (21/50) HCW nevytváří vůbec žádnou odpověď T-buněk proti souboru mutantních VOC B.1.1.529 (Omicron). Celkově naše zjištění u třikrát očkovaných HCW s různou historií předchozí infekce SARS-CoV-2 naznačují, že zkřížená rozpoznatelnost T buněk vůči S1 antigenu B.1.1.529 (Omicron) a peptidovému poolu byla významně snížena.
Není to dobré. Velká část plně očkovaných (bez ohledu na předchozí anamnézu infekce) nevytváří dobré odpovědi T buněk. Nyní tedy máme důkazy naznačující jak špatnou B, tak špatnou T odpověď na Omicron, nebo jinými slovy Omicron se vyvinul tak, že uniká jak B, tak T buněčné adaptivní imunitě (relativně ve srovnání s jinými variantami). Ale proč a jak?
Mutace hrotu B.1.1.529 (Omicron) zahrnují zisk a ztrátu epitopů buněk T
Imunizace transgenních myší HLAII buď předky Wuhan Hu-1, nebo sekvenčně specifickými peptidovými pooly B.1.1.529 (Omicron) nám umožnila zkoumat rozdílný, sekvenčně specifický priming T buněk, ke kterému dochází v důsledku mutací hrotu B.1.1.529 (Omicron). Ukázali jsme, že priming jedním poolem vede ke zhoršení reakcí na druhý.
Mutace G142D/del 143-5 vytvořila epitop se ziskem funkce, který přešel z oblasti nerozpoznávané T-buňkami na oblast, která indukovala efektorový program Th1/Th17. Již dříve jsme ukázali, že mutace N501Y mění epitop stimulující efektorové buňky T na epitop indukující imunitní regulaci.
Imunita B buněk po infekci B.1.1.529 (Omicron)
Dále jsme studovali třikrát očkované HCW 14 týdnů po třetí dávce, u nichž došlo k průlomové infekci během vlny B.1.1.529 (Omicron). Předtím infekčně naivní HCW očkovaní trojkombinací vytvořili po infekci během vlny B.1.1.5129 (Omicron) významně zvýšené zkříženě reagující vazebné protilátky proti všem VOC a samotné B.1.1.529 (Omicron): S1 RBD, celý hrot a nAb IC50. Vazba protilátek a nAb IC50 však byly oslabeny proti samotné B.1.1.529 (Omicron) se 4,5násobným snížením vazby S1 RBD (p = 0,001) a 10,1násobným snížením nAb IC50 (p = 0,002) proti B.1.1.529 ve srovnání s předkem Wuhan Hu-1. Infekce během vlny B.1.1.529 (Omicron) tedy vyvolala silnou zkříženě reagující protilátkovou imunitu proti všem VOC, ale méně proti samotné B.1.1.529 (Omicron). Důležité je, že třikrát očkované, infekčně naivní HCW, které nebyly infikovány během vlny B.1.1.529 (Omicron), nevytvořily 14 týdnů po třetí dávce vakcíny žádnou nAb IC50 odpověď proti B.1.1.529 (Omicron), což svědčí o rychlém odeznění nAb IC50.
Infekce kmenem Omicron posílila imunitu proti předchozím kmenům u třikrát očkovaných HCW, ale ne tolik proti sobě samé. U třikrát očkovaných HCW, kteří nebyli infikováni předchozími virovými kmeny včetně Omicronu, se neutralizační protilátky proti Omicronu po třetí vakcinaci rychle ztrácely.
HCW s anamnézou předchozí infekce virem Wuhan Hu-1, kteří byli rovněž infikováni během vlny B.1.1.529 (Omicron), nevykazovali žádné zvýšení zkřížené reakce S1 RBD nebo vazby celého hrotu protilátek nebo živého viru nAb IC50 proti B.1.1.529 (Omicron) nebo jakémukoli jinému VOC, přestože vytvořili vyšší protilátkovou odpověď N. Infekce B.1.1.529 (Omicron) tedy může zvýšit vazebné a nAb odpovědi proti sobě samému a jiným VOC u třikrát očkovaných dříve neinfikovaných infekčně naivních HCW, ale ne v kontextu imunitního imprintingu po předchozí infekci Wuhan Hu-1. Imunitní imprinting v důsledku předchozí infekce Wuhan Hu-1 zcela zrušil jakoukoli zvýšenou nAb odpověď proti B.1.1.529 (Omicron) a jiným VOC.
V zásadě platí, že pokud byli HCW nejprve infikováni původním kmenem Wuhan (jako já), nevytvářejí po infekci Omicron zvýšenou neutralizační protilátkovou odpověď (ve srovnání s těmi, kteří jsou trojvakcinováni, ale nebyli předtím infikováni původním kmenem Wuhan). Zdá se tedy, že předchozí infekce kmenem Wuhan blokuje tvorbu neutralizačních protilátek během/po infekci kmenem Omicron. A to je do značné míry důkazem efektu imunitního imprintingu.
Souhrnně lze říci, že infekce kmenem B.1.1.529 (Omicron) vedla ke zvýšeným, zkříženě reaktivním Ab odpovědím proti všem testovaným VOC u HCW očkovaných třemi dávkami vakcíny, ale ne u těch, kteří byli dříve infikováni kmenem Wuhan Hu-1, a méně proti samotnému kmeni B.1.1.529 (Omicron).
Takže, máme tedy imunitní imprinting s odpověďmi B buněk/protilátek, co odpovědi T buněk?
Imunita T buněk po infekci B.1.1.529 (Omicron)
Dále jsme zkoumali imunitu T buněk po průlomové infekci během vlny B.1.1.529 (Omicron). Čtrnáct týdnů po třetí dávce (9/10, 90%) třikrát očkovaných, dříve infekčně naivních HCW nevykazovalo žádnou zkříženou reaktivní imunitu T buněk proti S1 proteinu B.1.1.529 (Omicron).
Po očkování došlo k rychlé ztrátě jakékoli detekovatelné T buněčné imunity proti S1, který je hlavním antigenem ve vakcínách. Není to dobré.
HCW infikovaní během vlny B.1.1.529 (Omicron) vykazovali podobné T buněčné odpovědi proti proteinům spike MEP, původnímu S1 Wuhan Hu-1 a S1 B.1.617.2 (Delta), ale výrazně snížené T buněčné odpovědi proti S1 proteinu B.1.1.529 (Omicron).
Ačkoli průlomová infekce u trojvakcín během infekční vlny Omicron zvýšila zkříženě reagující imunitní rozpoznávání T buněk proti souboru hrotů MEP (p = 0,0117), předkům Wuhan Hu-1 (p = 0,0039), B.1 .617.2 (Delta) (p = 0,0003) a B.1.1.529 (Omicron) , byla odpověď T buněk proti samotnému S1 proteinu B.1.1.529 (Omicron) ve srovnání s hrotovým MEP (p = 0,001), Wuhan Hu-1 (p = 0,001) a B.1.617.2 (Delta) (p = 0,001) významně snížena.
Plně vakcinovaní, ale po infekci kmenem Omicron, významně snížili odpovědi T buněk proti S1 proteinu Omicron, ale stále zvyšovali odpovědi na předchozí kmeny. To je v podstatě nastavení buď na chronickou infekci Omicronem, nebo na rychlou reinfekci Omicronem.
Důležité je, že žádný (0/6) HCW s předchozí anamnézou infekce SARS-CoV-2 během vlny Wuhan Hu-1 nereagoval na S1 protein B.1.1.529 (Omicron) (obr. 5A). To naznačuje, že v tomto kontextu nebyla infekce B.1.1.529 (Omicron) schopna posílit imunitu T buněk proti samotnému B.1.1.529 (Omicron); imunitní imprinting z předchozí infekce Wuhan Hu-1 vedl k absenci odpovědi T buněk proti S1 proteinu B.1.1.529 (Omicron).
Zjištění důsledně ukazují, že u osob původně infikovaných Wuhan Hu-1 v první vlně a poté znovu infikovaných během vlny B.1.1.529 (Omicron) nedochází k posílení imunity T buněk proti B.1.1.529 (Omicron) na úrovni nAb a rozpoznávání T buněk.
U těchto HCW, pokud jste byli infikováni původním kmenem Wuhan, poté očkováni a poté znovu infikováni Omicronem, nevytváříte dobrou neutralizační protilátkovou nebo T buněčnou odpověď proti Omicronu. Velmi špatná zpráva. Další důkaz o počátečním imunitním imprintingu posíleném opakovaným očkováním původní vakcínou s hrotovou mRNA odvozenou od viru Wuhan, který způsobuje neschopnost reagovat na Omicron. Opravdu to vypadá, že tento druh pacientů se může stát živnou půdou pro další vlnu variant vakcíny Omicron.
Předchozí infekce odlišně ovlivňuje imunitu T a B buněk Omicronu
Abychom podrobněji prozkoumali vliv předchozí infekce SARS-CoV-2 na imunitní imprinting, dále jsme zkoumali odpovědi v naší longitudinální kohortě HCW. Nejprve jsme se zaměřili na vazebné protilátkové odpovědi S1 RBD (předek Wuhan Hu-1 a Omicron VOC) v longitudinální kohortě v klíčových časových bodech očkování a infekce SARS-CoV-2 a zkoumali jsme, jak různá expozice vtiskla rozdílnou zkříženou reaktivní imunitu a trvanlivost. To odhalilo, že 16–18 týdnů po infekci Wuhan Hu-1 nebo infekci B.1.1.7 (Alpha) neočkované HCW nevykazovaly žádné detekovatelné zkříženě reaktivní S1 protilátky RBD vázající se proti B.1.1.529 (Omicron).
Jinými slovy, Omicron se vyvinul tak, aby se zcela vyhnul jakýmkoli protilátkám vzniklým při přirozené infekci původními kmeny Wuhan nebo Alpha.
Hybridní imunita (kombinace předchozí infekce a jedné dávky vakcíny) významně zvýšila S1 RBD vazebných protilátek proti B.1.1.529 (Omicron) (p < 0,0001) ve srovnání s odpověďmi infekčně naivních HCW, které byly po jedné dávce vakcíny nedetekovatelné. Tento nárůst byl významně vyšší u HCW infikovaných dříve vakcínou Wuhan Hu-1 než B.1.1.7 (Alpha).
Dobrá zpráva. Předchozí infekce buď původním kmenem Wuhan, nebo Alpha, po níž následovala jediná dávka mRNA, vedla k detekovatelným protilátkám proti Omicronu, ačkoli to fungovalo lépe, pokud jste byli nejprve infikováni původním kmenem Wuhan, a nikoli kmenem Alpha.
Nicméně 20–21 týdnů po druhé dávce vakcíny byl zaznamenán diferenciální úbytek B.1.1.529 (Omicron) RBD Ab, přičemž téměř všichni (19/21) HCW infikovaní během druhé vlny B.1.1.7 (Alpha) již nevykazovali detekovatelné zkříženě reagující protilátky proti RBD B.1.1.529 (Omicron).
Ups. Jedna dávka mRNA vakcíny po přirozené infekci je dobrá. Dvě dávky nejsou dobré. To naznačuje hluboký rozdílný vliv imunitního imprintingu na slábnutí specifických imunitních protilátek proti B.1.1.529 (Omicron) mezi HCW infikovanými Wuhan Hu-1 a B.1.1.7 (Alpha), protože tento rozdíl není patrný u Ab odpovědí na původní spike S1 RBD WuhanHu-1.
Čtrnáct týdnů po třetí dávce vakcíny vykazovali dříve infekčně naivní HCW infikovaní během vlny B.1.1.529 (Omicron) zvýšené vazebné odpovědi na S1 RBD B.1.1.529 (Omicron), ale HCW infikovaní dříve Wuhan Hu-1 nikoliv, což naznačuje, že předchozí jedinci infikovaní Wuhan Hu-1 byli imunitně imprintováni, aby nezvýšili vazebné odpovědi na protilátky proti B.1.1.529 (Omicron), přestože byli infikováni samotnou B.1.1.529 (Omicron).
Tři dávky mRNA vakcíny u osob, které nikdy nebyly infikovány virem, vykazují tvorbu protilátek proti hrotovému proteinu Omicron, ale ne v případě, že HCW byly předtím nejprve infikovány původním kmenem Wuhan.
Ve skutečnosti infekce během vlny B.1.1.529 (Omicron) vtiskla konzistentní relativní hierarchii zkřížené neutralizační imunity proti VOC u různých osob se silnými zkříženými nAb odpověďmi proti B.1.1.7 (Alfa), B.1.351 (Beta) a B.1.617.2 (Delta) (obr. 6, D a E). Srovnávací analýza účinnosti nAb pro zkříženou neutralizaci VOC zdůraznila vliv imunitního imprintingu, který účinně ruší nAb odpovědi u těch očkovaných HCW, kteří se infikovali během první vlny a poté se znovu infikovali během vlny B.1.1.529 (Omicron).
Pokud byli HCW nejprve infikováni kmenem Wuhan, poté očkováni a poté znovu infikováni Omicronem, imunitní imprinting spojený s první infekcí a následným očkováním do značné míry zničil jejich schopnost účinně reagovat na Omicron.
Ano, Virginie, nucení HCW, kteří byli předtím infikováni kmenem Wuhan, aby si vzali tři dávky mRNA vakcíny, skutečně do značné míry zničilo jejich schopnost vytvořit silnou imunitní odpověď proti Omicronu. Nevyřešené zůstává, zda plně očkovaní lidé, kteří skončili v nemocnicích a/nebo zemřeli na Omicron, byli nejprve infikováni jiným kmenem, než se stali plně očkovanými.
Co z toho všeho autoři vyvozují?
Diskuse
Molekulární charakterizace přesného mechanismu, který je základem utváření repertoáru z kombinace infekce kmenem Wuhan Hu-1 nebo B.1.1.7 (Alpha) a trojího očkování s použitím ancestrální sekvence Wuhan Hu-1, ovlivňujícího imunitní odpovědi na následné VOC, bude vyžadovat podrobnou analýzu rozdílných imunitních repertoárů a jejich strukturálních důsledků. Dopad rozdílného imprintingu se projevil stejně hluboce v rozpoznávání T-lymfocytů S1 B.1.1.529 (Omicron), který nebyl rozpoznán T-lymfocyty žádného z trojvakcinovaných HCW, kteří byli původně infikováni během vlny Wuhan Hu-1 a poté znovu infikováni během vlny B.1.1.529 (Omicron). Důležité je, že zatímco infekce virem B1.1.529 (Omicron) u osob očkovaných trojvakcínou, které předtím nebyly infikovány, mohla skutečně zvýšit protilátkové odpovědi, odpovědi T-buněk a MBC proti jiným VOC, odpovědi proti sobě samé byly sníženy. Tato relativně nízká imunogenicita proti sobě samému může pomoci vysvětlit, proč se časté reinfekce B.1.1.529 (Omicron) s krátkými časovými intervaly mezi infekcemi ukazují jako nový rys této vlny. Souhlasí také s pozorováním, že očkování mRNA nesoucí sekvenci hrotu B.1.1.529 (Omicron) (Omicron třetí dávka po primární/boostovací sekvenci předků) nenabízí žádnou ochrannou výhodu.
Souhrnně tyto studie ukázaly, že vysoká globální prevalence infekcí a reinfekcí B.1.1.529 (Omicron) pravděpodobně odráží značnou subverzi imunitního rozpoznávání jak na úrovni B, T buněk, tak na úrovni vazby protilátek a nAb, i když se značnou diferenční modulací prostřednictvím imunitního imprintingu. Některé imprintované kombinace, jako například infekce během vlny Wuhan Hu-1 a Omicron, přinášejí obzvláště oslabené reakce.
A vláda nám i nadále radí, že všechny naše děti, z nichž většina již byla infikována a viru se zbavila bez větších problémů, by se měly nechat očkovat?
Tyto údaje mohou pomoci vysvětlit negativní účinnost, která je pozorována při očkování "plnou" mRNA u těch, kteří byli infikováni Omicronem. Podívejte se například na nejnovější klinické údaje z Kanady a Portugalska.